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人抗著絲點(diǎn)抗體(ACACENP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書
發(fā)布時(shí)間:2025/8/1瀏覽:160次
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  以下是?人抗著絲點(diǎn)抗體(ACA/CENP) ELISA試劑盒?的實(shí)驗(yàn)使用說明書核心內(nèi)容,綜合整理自多個(gè)供應(yīng)商的標(biāo)準(zhǔn)化操作流程:

  BS-1458人抗著絲點(diǎn)抗體(ACA/CENP)ELISA試劑盒

  一、實(shí)驗(yàn)原理?

  采用雙抗體夾心法(固相ELISA),通過生物素標(biāo)記的抗體與ACA/CENP結(jié)合,再經(jīng)HRP標(biāo)記的親和素催化底物顯色,顏色深度與樣本中ACA/CENP濃度成正比。

  二、試劑盒組成?

  組分 96T規(guī)格 48T規(guī)格 保存條件

  酶標(biāo)板 12孔×8條 6孔×8條 2~8℃

  標(biāo)準(zhǔn)品(400ng/ml) 0.6ml 0.3ml 需稀釋后使用

  生物素標(biāo)記抗體 6ml 3ml 即用型

  HRP-親和素 10ml 5ml 避光保存

  底物A/B 各6ml 各3ml 避光(B液對(duì)光敏感)

  終止液 6ml 3ml 腐蝕性,需密封

  三、樣本處理?

  血清/血漿?:

  室溫凝固10-20分鐘,離心(2000-3000rpm,20分鐘)取上清,避免反復(fù)凍融。

  抗凝劑推薦EDTA或肝素,避免溶血。

  細(xì)胞上清/組織勻漿?:離心去除顆粒物,稀釋至線性范圍內(nèi)。

  四、操作步驟?

  包被與孵育?:

  標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋后加入微孔板,每孔100μl,設(shè)空白對(duì)照(僅加稀釋液)。

  37℃孵育60分鐘,洗滌3次(拍干,避免交叉污染)。

  抗體反應(yīng)?:

  加生物素標(biāo)記抗體50μl,37℃孵育30分鐘,洗滌。

  加HRP-親和素100μl,避光孵育30分鐘。

  顯色與終止?:

  加TMB底物100μl,避光反應(yīng)15-20分鐘,顯藍(lán)色。

  加終止液100μl,黃色為最終顏色,30分鐘內(nèi)測(cè)OD450nm(參考630nm扣除背景)。

  五、注意事項(xiàng)?

  安全操作?:

  避免皮膚接觸終止液和底物B,操作時(shí)佩戴手套。

  使用一次性吸頭,金屬加樣器可能干擾結(jié)果。

  質(zhì)量控制?:

  標(biāo)準(zhǔn)曲線R2應(yīng)≥0.99,樣本S/N值≥2.1判為陽性。

  不同批次試劑不可混用。

  六、技術(shù)支持?

  部分供應(yīng)商提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)及實(shí)驗(yàn)問題指導(dǎo)(如上海一研、森貝伽)。

  完整英文說明書需聯(lián)系供應(yīng)商獲取。

  如需具體品牌試劑盒的差異說明或優(yōu)化方案,可進(jìn)一步提供供應(yīng)商名稱以便細(xì)化。

  注:以上資料僅供參考,具體產(chǎn)品信息請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。

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