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人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16p16(IFI16p16)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書
發(fā)布時(shí)間:2025/8/11瀏覽:26次
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  以下是關(guān)人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說明,綜合整理自不同來源的可靠信息:

  BS-0383人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒

  一、實(shí)驗(yàn)原理?

  該試劑盒采用?雙抗體夾心法ELISA技術(shù)?:

  將捕獲抗體包被于微孔板上,結(jié)合樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的待測物IFI16p16。

  加入生物素標(biāo)記的檢測抗體,形成“捕獲抗體-抗原-檢測抗體"復(fù)合物。

  通過鏈霉親和素偶聯(lián)的辣根過氧化物酶(HRP)催化底物TMB顯色,顏色深淺與待測物濃度成正比,最終通過酶標(biāo)儀測定吸光度(OD值)計(jì)算濃度。

  二、試劑盒組成與儲(chǔ)存?

  主要組分?:

  包被抗體、檢測抗體、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記物、顯色液(TMB)、終止液等。

  儲(chǔ)存條件?:

  未開封試劑盒需2-8℃避光保存;部分組分(如顯色液)需嚴(yán)格避光。

  有效期?:通常為6個(gè)月,具體以標(biāo)簽為準(zhǔn)。

  三、樣品處理要求?

  血清/血漿?:

  采集后室溫靜置2小時(shí)或4℃過夜,1000×g離心20分鐘,取上清保存于-20℃(避免反復(fù)凍融)。

  組織勻漿?:

  用預(yù)冷PBS沖洗組織,按1:9(重量體積比)勻漿,離心取上清。

  注意事項(xiàng)?:

  避免溶血、高血脂或含NaN3的樣本(NaN3抑制HRP活性)。

  四、操作步驟?

  試劑準(zhǔn)備?:

  標(biāo)準(zhǔn)品需現(xiàn)用現(xiàn)配,不可保存;洗滌液按1:50稀釋。

  加樣與孵育?:

  依次加入標(biāo)準(zhǔn)品/樣品、檢測抗體、HRP標(biāo)記物,每步需充分洗滌。

  顯色與讀數(shù)?:

  加入TMB顯色10-30分鐘,終止液終止反應(yīng)后,立即用450nm波長測OD值。

  五、注意事項(xiàng)?

  安全防護(hù)?:

  避免接觸終止液和底物(有毒),操作時(shí)戴手套,勿用嘴吸取試劑。

  實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)?:

  加樣順序一致,避免氣泡;洗滌需拍干;顯色液避光保存。

  質(zhì)量控制?:

  每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品建議做復(fù)孔;超出檢測范圍需稀釋后重測。

  六、常見問題?

  顯色異常?:若孔內(nèi)呈綠色,表明終止液未混勻。

  數(shù)據(jù)偏差?:可能由樣本處理、試劑批次或儀器誤差引起,需重復(fù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。

  注:以上資料僅供參考,如需更詳細(xì)的操作圖示或標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制方法,可參考試劑盒附帶的說明書或聯(lián)系供應(yīng)商獲取技術(shù)支持。

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